Radioimmunoassay zum Nachweis von Hepatitis B (HB, Australia) – Antigen im Serum

An Seren von 321 Patienten wurde nach Vielfachbestimmungen durch hierarchische Varianzanalyse ein solid-phase Radioimmunoassay !-Ausria, Abbott Lab. Inc.) hinsichtlich Prazision, Fehlermoglichkeiten und Verbesserungsmoglichkeiten gepruft. Zur besseren Vergleichbarkeit der Ergebnisse, die mit unterschiedlichen technischen Ausrustungen gewonnen werden, erfolgt die Angabe der Entscheidung: „Serum antigenhaltig" oder „Antigen nicht nachweisbar" in Form eines Quotienten aus der Zahlrate des Probandenserums und dem „Negativwert" der jeweiligen Serie (RIA-Faktor). Anstelle eines willkurlichen Grenzwertes fur die Entscheidung „Serum antigenhaltig" wurde mit Hilfe von Seren von Patienten, die an einer Hepatitis B mit transienter Antigenamie erkrankt waren und zum Zeitpunkt der letzten Antigenbestimmung weder nach klinischen, laborchemischen und histologischen Gesichtspunkten Zeichen eines Leberschadens auf wiesen, ein „Normbereich" ermittelt (Mittelwert 1,2; s = 0,2). Der durch Vielfachbestimmungen an verschiedenen Patientenseren ermittelte Gesamtfehler der Methode betragt bei Doppelbestimmungen ± 16%. Der relativ hohe Variationskoeffizient schrankt jedoch die Differenzierungsqualitat des Verfahrens nicht entscheidend ein. Verlaufsbeobachtungen an Patientenseren mit Antigenamie und Verdunnungsreihen liesen erkennen, das nur in einem eng begrenzten Bereich ein lineares Verhaltnis zwischen Antigenkonzentration im Serum und Hohe des RIA-Faktors besteht. Die relative Empfindlichkeit des Testansatzes im Vergleich zur Komplementbindungsreaktion lag mit einer im Mittel 32—64-fach hoheren Empfindlichkeit in der Grosenordnung anderer radioimmunologischer Verfahren. Die Menge des eingesetzten Probandenserums und die des zugefugten radioaktiven Antikorpers waren im Sattigungsbereich der Methode und bei antigenfreien Seren ohne Einflus auf das Testergebnis. Die in dieser Untersuchung eingesetzten Pharmaka zeigten keinen Einflus auf die Mesergebnisse. Bei Patienten mit Rheumafaktor im Serum, die an einer Hepatitis B erkrankten, war die Antigenamie in jedem untersuchten Fall nachweisbar. Eindeutig zeigte sich eine Abhangigkeit der Testergebnisse von der Inkubationsdauer und der Inkubationstemperatur. Untersuchungen an 30 Seren unterschiedlicher Antigenkonzentration lassen erkennen, das die Zeit der Erstinkubation ohne Empfindlichkeitsverlust auf 3 h verkurzt werden kann, wenn gleichzeitig die Inkubationstemperatur (hier 37°C) erhoht wird.