The effect of temperature on the hemagglutinin activity of the canine adenovirus (infectious canine hepatitis virus).

Summary The thermal inactivation of the hemagglutinin activity of the ICH virus takes place in two thermodynamically different reactions which intersect at a temperature of 47° C. At temperatures below the intersection the energy of activation Δ H+ is 17kcal/mol and the entropy of activation Δ S+ equals — 14 cal/mol/degree; at temperatures higher than 47° C the Δ H+ is 159 kcal/mol and Δ S+ is 429 cal/mol/degree. At higher temperatures the inactivation of hemagglutinin runs parallel with the inactivation of infectivity, whereas at lower temperatures the two inactivation processes differ. The inactivation curves for the activity of hemagglutinin are of three types: up to 45° C they are monophasic, round about 47° C they consist of two phases, one slow and the other rapid, and at temperatures from 52° C to 56° C they are again biphasic but the first phase is rapid and the second slow. The second phases of both infectivity and hemagglutinin activity are the same at these temperatures, which is in keeping with the infectivity inactivation rate at temperatures below 47° C. The effect of temperature on the chromatographic patterns of the ICH virus was also studied. The first fraction, eluted at 0.18 M NaCl and pH 7.4, completely disappears in a short time, which makes it different from higher NaCl molarity fractions. The ICH virus hemagglutinin shows a high stability temperature. At 20° C, 37° C and 56° C this stability is characterized by half-lives of 36 days, 7 days and 5 minutes, respectively. Zusammenfassung Der Einflus verschiedener Temperaturen auf die Hamagglutininaktivitat des Virus der infektiosen Hundehepatitis (H.c.c.-Virus) Die thermische Inaktivierung der Hamagglutininaktivitat des H. c. c-Virus verlauft in zwei unterschiedlichen thermodynamischen Reaktionen. Betragt die Versuchstemperatur 47° C, so verlaufen diese gleichartig. Bei Temperaturen unter 47° C betragt die Energie 17kcal/Mol und die Entropie — 14 col/Mol/Grad, wahrend bei uber 47 CX die Energie 159kcal/Mol und die Entropie 429 cal/Mol/Grad betragt. Unter hoheren Versuchstemperaturen lauft die Inaktivierung der Hamagglutininaktivitat parallel mit derjenigen der Infektiositat. Bei tieferen Temperaturen unterscheiden sich die beiden Inaktivierungsprozesse. Die Hamagglutinin-Inaktivierung ist von der Versuchstemperatur abhangig. Bis45° C verlauft die Inaktivierungskurve monophasisch, bei Temperaturen um 47° C und daruber biphasisch. Bei chromatografischer Auftrennung verschiedener H. c. c.-Virusfraktionen wurde die mit der niedrigsten Molaritat NaCl (0,18 Mol, pH 7,4) gewonnene Fraktion am schnellsten inaktiviert. Das Hamgglutinin des H. c. c.-Virus erwies sich als sehr temperaturstabil. Bei 20° C, 37° C bzw. 56° C betrug seine Halbwertszeit 36 Tage, 7 Tage bzw. 5 Minuten. Resume Influence de la temperature sur l'activite hemagglutinante du virus de l'hepatite infectieuse du chien (virus h.c.c.) L'inactivation thermique de l'activite hemagglutinante du virus h. c. c. s'accomplit en deux reactions thermodynamiques differentes. Si la temperature de l'experience se trouve a 47° C, ces deux etapes se deroulent de meme facon. Avec des temperatures inferieures a 47° C, on a une energie de 17 kcal/mol et une entropie de — 14 cal/mol/degre, alors qu'avec des temperatures superieures a 47° C, l'energie comprend 159 kcal/mol et l'entropie 429 cal/mol/degre. A des temperatures d'experience plus elevees, l'inactivation de l'activite hemagglutinante et de l'infectiosite se developpent en parallele. A des temperatures plus basses, les deux processus d'inactivation se differencient l'un de l'autre. L'inactivation de l'hemagglutinine depend de la temperature d'experience. Jusqu'a 45° C, la courbe d'inactivation est monophasique, a des temperatures egales ou superieures a 47° C, elle est biphasique. Lors de la separation chromatographique des differentes fractions du virus h. c. c, c'est la fraction obtenue a la molarite la plus basse du NaCl (0,18 mol, pH 7,4) qui est inactivee le plus rapidement. L'hemagglutinine du virus h. c. c. s'est revelee tres stable au point de vue thermique. A 20° C, 37° C, resp. 56° C, on trouve une demi-vie de 36 jours, 7 jours, resp. 5 minutes. Resumen El influjo de diferentes temperaturas sobre la actividad hemoaglutininica del virus de la hepatitis infecciosa del perro (virus h. c. c.) La inactivacion termica de la actividad hemoaglutininica del virus de la h. c. c. discurre en dos reacciones termodinamicas diferentes. Cuando la temperatura de ensayo es de 47° C, ambas son similares. Con temperatures inferiores a 47° C, la energia es de 17 kcal/mol y la entropia — 14 cal/mol/grado, mientras que por encima de 47° C la energia asciende a 159 kcal/mol y la entropia a 429 cal/mol/grado. Bajo temperaturas de ensayo superiores, la inactivacion de la actividad hemoaglutininica se produce de forma paralela a la de la infecciosidad. Con temperaturas inferiores, se diferencian ambos procesos de inactivacion. La inactivacion de las hemoaglutininas depende de la temperatura de ensayo. Hasta 45° C, la curva de inactivacion discurre monofasica, mientras que con temperaturas alrededor de 47° C y mas, bifasica. En el desdoblamiento cromatografico de diversas fracciones de virus h. c. c. se inactivo con rapidez maxima la fraccion obtenida con la molaridad NaCl mas baja (0,18 mol, pH 7.4). La hemoaglutinina del virus h. c. c. resulto ser muy termorresistente. A 20° C, 37° C y 56° C, respectivamente, su tiempo semivalor era de 36 dias, 7 dias y 5 minutos.