Determination of Histamine in Fish Sauce by Photometric Flow Injection Analysis with Immobilized Histamine Oxidase Reactor

Hazard analysis critical control pointでの化学的危害要因物質であるヒスタミンの迅速な測定のために，固定化酵素リアクターを用いる一流路の吸光光度検出/フローインジェクション分析法を開発した．固定化酵素はトレシル化した親水性ビニルポリマービーズにヒスタミンオキシダーゼ（HOD）及びペルオキシダーゼ（POD）を固定化して調製した．発色試薬溶液をキャリヤーとし，その流れの中に試料を注入した．試料は固定化HODで過酸化水素に変換され，その後固定化PODで生成した呈色物質の吸光度を530 nmで測定した．ヒスタミン濃度10∼1000 μMの間で吸光度との間に直線関係が成立した．測定時間は3分であった．本法を魚醤中のヒスタミンの定量に応用した．魚醤を25又は50倍に緩衝液（pH 8.0）で希釈し，その100 μLを注入した．本法の結果と高速液体クロマトグラフィーとの結果は良い相関関係を示した．