Brucella abortus detected in cheese from the Amazon region: differentiation of a vaccine strain (B19) from the field strain in the states of Pará, Amapá and Rondônia, Brazil

A brucelose e uma enfermidade infecto-contagiosa que causa grandes perdas economicas a cadeia produtiva da carne e do leite, como consequencia dos disturbios reprodutivos nos animais, alem de ser uma antropozoonose cronica. O objetivo deste estudo foi detectar DNA de Brucella spp. e fazer a distincao da cepa vacinal (B19) da cepa de infeccao de campo. Foram adquiridas 66 amostras de diferentes queijos produzidos e comercializados em tres estados pertencentes a Amazonia brasileira: Amapa (05), Para (55) e Rondonia (06), somando 39 amostras de queijo de vaca e 27 de bufala. Deste total quatro eram produzidas em estabelecimentos com fiscalizacao de Servico de Inspecao Federal, nove em estabelecimentos com Servico de Inspecao Estadual, cinco eram de producao artesanal e as demais 48 amostras eram provenientes de producao informal. O DNA das amostras teste foi obtido por um protocolo de extracao e a reacao em cadeia pela polimerase foi realizada utilizando os oligoiniciadores B4 e B5 para detectar Brucella spp. e, os oligoiniciadores eri1 e eri2 para diferenciar cepa de infeccao a campo da cepa vacinal B19. Os resultados mostraram que 21,21% (14/66) das amostras foram positivas para Brucella spp., destas 21,43% (3/14) foram positivas para B. abortus cepa de campo e 7,14% (1/14) foi identificada como cepa vacinal B19. Concluiu-se que foi possivel identificar pela tecnica da PCR Brucella spp. em queijos na regiao amazonica, alem de diferenciar as cepas em amostra de B. abortus de infeccao a campo ou cepa vacinal B19.

[1]  Carina Martins de Moraes,et al.  Detecção de fraude em amostras comerciais de queijo bubalino por adição de leite bovino por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) multiplex , 2015 .

[2]  Letícia Marie Lira Umeda Avaliação da persistência da vacina B19 pelo Teste do Antígeno Acidificado Tamponado e PCR em bezerras vacinadas , 2014 .

[3]  Miguel Aiub Hijjar,et al.  Programa Nacional de Controle da Tuberculose (PNCT) , 2014 .

[4]  Rajveer,et al.  Markers for the molecular diagnosis of brucellosis in animals. , 2014 .

[5]  F. Şahin,et al.  PCR detection of Brucella abortus in cow milk samples collected from Erzurum, Turkey , 2013 .

[6]  A. Farrokh,et al.  Evaluation of PCR, Culture and serology methods for the Detection of Brucella spp in fresh cheese samples , 2013 .

[7]  W. Pacheco,et al.  Excretion of Brucella abortus vaccine B19 strain during a reproductive cycle in dairy cows , 2012, Brazilian journal of microbiology : [publication of the Brazilian Society for Microbiology].

[8]  André Mendes Jorge,et al.  Brucelose em bubalinos: uma revisão com ênfase ao sorodiagnóstico oficial , 2012 .

[9]  A. S. Amin,et al.  Evaluation of PCR Assay for Detection of Cow's Milk in Water Buffalo's Milk , 2009 .

[10]  Cristina Bergman Zaffari,et al.  Qualidade bacteriológica de queijos artesanais comercializados em estradas do litoral norte do Rio Grande do Sul, Brasil , 2007 .

[11]  R. Dias,et al.  Detection of Brucella abortus DNA in illegal cheese from São Paulo and Minas Gerais and differentiation of B19 vaccinal strain by means of the polymerase chain reaction (PCR) , 2007 .

[12]  S. Vasconcellos,et al.  Diagnosis of Canine Brucellosis: Comparison between Serological and Microbiological Tests and a PCR Based on Primers to 16S-23S rDNA Interspacer , 2007, Veterinary Research Communications.

[13]  B. Çetinkaya,et al.  Evaluation of immunomagnetic separation-polymerase chain reaction in direct detection of Brucella abortus and Brucella melitensis from cheese samples. , 2006, Foodborne pathogens and disease.

[14]  M. Corbel,et al.  Brucellosis in humans and animals. , 2006 .

[15]  C. Woods,et al.  Adverse events in humans associated with accidental exposure to the livestock brucellosis vaccine RB51. , 2004, Vaccine.

[16]  Katia S. P. Perry Queijos: aspectos químicos, bioquímicos e microbiológicos , 2004 .

[17]  Z. Memish,et al.  Brucellosis and international travel. , 2004, Journal of travel medicine.

[18]  R. T. Nassu,et al.  Pesquisa de Salmonella sp., Listeria sp. e microrganismos indicadores higiênico-sanitários em queijos produzidos no estado do Rio Grande do Norte , 2003 .

[19]  A. Lage,et al.  Brucellosis in Brazil. , 2002, Veterinary microbiology.

[20]  G. Tantillo,et al.  Polymerase chain reaction for the direct detection of Brucella spp. in milk and cheese. , 2001, Journal of food protection.

[21]  B. Bricker,et al.  Enhancement of the Brucella AMOS PCR assay for differentiation of Brucella abortus vaccine strains S19 and RB51 , 1995, Journal of clinical microbiology.

[22]  B. Drasar,et al.  Detection of Brucella melitensis and Brucella abortus by DNA amplification. , 1992, The Journal of tropical medicine and hygiene.

[23]  A. Williams,et al.  THE ROLE OF ERYTHRITOL IN THE TISSUE LOCALIZATION OF THE BRUCELLAE. , 1965, British journal of experimental pathology.