Antimicrobial activity of plants from Brazilian Cerrado against Streptococcus mutans

Apesar do constante desenvolvimento do conhecimento, prevencao e tratamento da carie dental, esta doenca continua tendo alta prevalencia no Brasil e no mundo. Por este motivo, tem crescido o interesse por novos agentes farmacologicos que possam auxiliar no controle do biofilme dental, atuando contra o principal microrganismo associado ao desenvolvimento da carie, o Streptococcus mutans. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana do extrato de quatro plantas do cerrado brasileiro (e suas fracoes) contra S. mutans UA159. Extratos hidroalcoolicos de Lantana camara (Lc), Copaifera langsdorffii (Cl), Psidium guajava (Pg) e Cochlospermum regium (Cr), foram submetidos a testes de avaliacao da atividade antimicrobiana para determinacao das concentracoes inibitoria (CIM) e bactericida (CBM) minima, inibicao da aderencia e queda de pH em solucao. O extrato bruto das quatro plantas apresentaram potencial antimicrobiano e foram fracionados por gradiente de polaridade, sendo obtidas, para cada extrato, as fracoes hexânica (FHx), cloroformica (FCh), acetato de etila (FAc) e aquosa (FAq). Estas foram submetidas aos experimentos ja citados para determinacao da(s) fracao(oes) ativa(s) de cada extrato, selecionadas com base nos resultados dos testes de atividade antimicrobiana e no rendimento. Foram selecionadas, para a etapa subsequente de avaliacao em biofilme, 6 fracoes ativas: Lc-FHx e Lc-FCl, ambas com CIM = 15,6 µg/ml, e rendimento 9,5 e 17,5%, respectivamente; Cl-FHx, que apresentou CIM = 15,6 µg/ml, atividade inibitoria sobre a queda de pH em solucao e rendimento igual a 21%; Pg-FHx, com CIM = 125 µg/ml, 93,4% de inibicao da aderencia na concentracao de 62,5 µg/ml e rendimento igual a 2,0%; Cr-FHx, com CIM = 125 µg/ml, apresentou atividade inibitoria sobre queda de pH do meio e rendimento igual a 1,0% e Cr-FAq, que obteve CIM elevado, entretanto, inibiu 86,7% de aderencia bacteriana, na concentracao de 62,5 µg/ml, sendo o rendimento desta fracao 32%. As fracoes selecionadas foram submetidas a avaliacoes complementares, como: viabilidade bacteriana (time kill), inibicao de formacao e queda de pH em biofilme de S. mutans, utilizando discos de hidroxiapatita. Nos testes em biofilme, destacaram-se tres fracoes: Lc-FHx, que em concentracao 20xCIM, proporcionou reducao na viabilidade do microrganismo e diminuicao da formacao do biofilme tratado diariamente por 5 dias; Lc-FCh, que em concentracao equivalente a 20xCIM, reduziu a formacao de biofilme e Cl-FHx, que alem de reduzir a formacao de biofilme na concentracao de 20xCIM, interferiu na viabilidade do microrganismo, nas duas concentracoes testadas (10xCIM e 20xCIM). A composicao quimica das fracoes ativas em biofilme foi analisada por CG-EM. As demais fracoes testadas nesta etapa nao diferiram do controle negativo (veiculo) nos testes aplicados. Nenhuma das fracoes avaliadas afetou a reducao de pH do meio pelo biofilme. Em conclusao, as fracoes com polaridades baixa ou intermediaria das especies Lantana camara e Copaifera langsdorffii mostraram ter potencial para gerar novos compostos anti-carie de origem natural, tendo apresentado atividade antimicrobiana sobre o biofilme formado por S. mutans. Abstract