Ligature enzymatique d'oligonucleotides a substitution 3'-amino
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L'invention se rapporte a un procede et a des kits pour detecter un ou plusieurs acides nucleiques cibles. Un premier oligonucleotide ayant un groupe 3'-amino et un second oligonucleotide ayant un groupe 5'-phosphate sont reunis par annelage a une region complementaire contigue d'un acide nucleique cible. Chaque fois que les nucleotides terminaux 3' du premier oligonucleotide et les nucleotides 5' du second oligonucleotide sont complementaires des nucleotides opposes se trouvant sur l'acide nucleique cible, une ligase d'acide nucleique se joint par ligature aux premier et second oligonucleotides via la formation d'une liaison de phosphoramidate. La presence de l'acide nucleique est determinee par detection des premier et second oligonucleotides ligatures.
[1] R. Letsinger,et al. Synthesis and properties of oligonucleotides containing aminodeoxythymidine units. , 1992, Nucleic acids research.
[2] L E Orgel,et al. Oligoaminonucleoside phosphoramidates. Oligomerization of dimers of 3'-amino-3'-deoxy-nucleotides (GC and CG) in aqueous solution. , 1987, Nucleic acids research.
[3] M. Sporn,et al. The synthesis of phosphorylated 3′-amino-3′-deoxythymidine and 5′-amino-5′-deoxythymidine , 1970 .