Etude in vitro de l'association de cellules ostéogènes avec une céramique en phosphate de calcium macroporeuse

Les ceramiques en phosphate de calcium (PCa) sont des substituts osseux synthetiques capables de combler des pertes de substance osseuse en servant de support a la repousse osseuse. Ce travail a consiste a etudier in vitro les capacites osteogenes de cellules de moelle osseuse humaine cultivees sur une ceramique en PCa biphasee. La ceramique macroporeuse utilisee etait composee de 40 p. 100 d'hydroxyapatite et de 60 p. 100 de phosphate tricalcique-beta. Apres prelevement de la moelle sur heparine, la fraction de cellules mononucleees a ete isolee par gradient de centrifugation. Les capacites de proliferation ainsi que l'activite phosphatase alcaline produites par des cellu es ont ete analysees. La ceramique a ete observee en microscopie photonique, electronique a balayage et transmission. Les formations cristallines ont ete caracterisees par microanalyse X et diffraction electronique. Les resultats revelent que la proliferation cellulaire est significativement plus importante en milieu MacCoy's complet qu'en α-MEM, Apres une etape d'adhesion a la ceramique, les cellules proliferent aussi bien a la surface que dans les macropores de la ceramique et expriment une activite phosphatase alcaline croissante au cours du temps. Les cellules adherentes developpent apres 15 jours de culture un tapis cellulaire recouvert par endroit par une matrice extracellulaire fibrillaire mineralisee composee en partie de fibronectine, de collagene I et d'osteocalcine. Les cristaux observes sur les fibres sont majoritairement composees d'apatite deficiente en calcium. Les proprietes recherchees pour les materiaux en PCa sont l'osteoconduction (capacite a guider la reconstruction osseuse a leur contact) et l'osteoinduction (capacite a stimuler la formation osseuse meme en site extraosseux). Cependant, si la plupart des biomateriaux utilises comme substituts osseux sont, a des degres divers, osteoconducteurs, aucun n'est osteoinducteur. Le travail presente ici montre que des cellules de moelle osseuse cultivees sur une ceramique en PCa expriment des proprietes osteogenes in vitro. Une association ceramique-cellules de moelle osseuse devrait permettre de developper une ceramique en PCa possedant une capacite d'osteoinduction.