Type VI secretion system effectors

Mon travail a porte sur la caracterisation des effecteurs toxiques et proteines d’immunite du T6SS Sci-1 d’Escherichia coli Entero-agregatif, elements de la lutte inter-bacterienne. Nous avons identifie en outre Tle1, un effecteur de toxine code par ce groupe et montre que Tle1 possede des activites de phospholipase A1 et A2 requises pour detruire la cellule proie dans la competition interbacterienne. L'auto-protection de la cellule attaquante est assuree par une lipoproteine de membrane externe, Tli1, qui lie Tle1 dans un rapport stoechiometrique 1: 1 avec une affinite nanomolaire et inhibe son activite phospholipase. Il a ete predit que la proteine 435 provenant a partir d'un groupe de genes T6SS1 de l'agent pathogene AIEC LF82 est une phospholipase de la famille d'effecteurs Tle3 avec une activite PLA1. Sa toxicite peut etre neutralisee par la proteine d'immunite cognate 434 qui est un Tli3 putatif, en formant le complexe de proteine Tle3 - Tli3. Les deux proteines separees et leur complexe ont ensuite ete appelees proteines complexes Tle3AIEC, Tli3AIEC et Tle3AIEC - Tli3AIEC, respectivement. Afin d'etudier plus en detail le mecanisme de Tle3-AIEC et de Tli3-AIEC, nous avons realise l'expression, la purification, la caracterisation, la cristallisation des deux proteines et des etudes cristallographiques de rayons X preliminaires du complexe Tle3-AIEC/Tli3-AIEC afin de comprendre comment la proteine Tle3-AIEC reconnait et se lie a son effecteur apparente Tli3-AIEC et inhibe son activite. Les donnees preliminaires de diffraction des rayons X ont ete recueillies a partir de cristaux Tle3AIEC-SeMet/Tli3AIEC a une resolution de 3,8 A.