Virusdauerpassagen in Zellkulturen als modifizierender Faktor für die Entwicklung einer Lebendvaccine gegen die Maul‐ und Klauenseuche

Zusammenfassung Der Typ A4 des Maul- und Klauenseuchevirus wurde 450 mal in Nierenkulturen vom Schwein, Kalb und von der Maus passiert. Das Virus hat sich dabei stark verandert. Die biologischen Veranderungen betrafen die Virulenz fur Rind, Schwein und infantile Maus (Meerschweinchen wurden nicht untersucht), die Zytopathogenitat fur heterologe Zellkulturen, die Kontagiositat fur das Rind und Schwein und die immunisierenden Eigenschaften. Da sich das Virus wahrend des Modifizierungsprozesses zuerst in Richtung Myotropismus anderte, buste es seine Vermehrungsfahigkeit in Haut und Schleimhauten fruher ein als in der Muskulatur. Dieser Vorgang begunstigte bei Benutzung geeigneter Zellkulturen eine brauchbare Kombination von Wirksamkeit und Unschadlichkeit. Am nachhaltigsten modifizierten die Passagen in den Schweinenieren-kulturen das Virus. Hierbei verminderte sich nicht nur die Virulenz des Virus, sondern gleichzeitig auch seine immunisierende Eigenschaft fur das Rind. Passagen in Schweinenierenkulturen sind deshalb im Vergleich zu solchen in Kalber- und Mausenierenkulturen als modifizierender Faktor fur die Entwicklung einer Lebendvaccine fur Rinder am wenigsten geeignet. Am besten lies sich die Veranderung der Virulenz und Kontagiositat und die Bestandigkeit der immunisierenden Eigenschaften durch die Passagen in den Kalbernierenkulturen kombinieren. Nach 370 Passagen war das Virus in Richtung Unschadlichkeit und Wirksamkeit so weit modifiziert, das es nach intramuskularer Impfung als Lebendvaccine fur Rinder zur Diskussion gestellt werden kann, da die geimpften Rinder Schweine durch Kontakt nicht mehr krank machten. Eine Passage, die in gleicher Weise fur die Impfung der Schweine geeignet ware, wurde noch nicht gefunden. Die Typenspezifitat ist wahrend der 450 Passagen in den 3 verschiedenen Kulturarten erhalten geblieben. Summary The length of virus passage in cell cultures as a modifying factor in the preparation of live foot-and-mouth disease vaccine Type A4 virus was passaged 450 times in kidney cultures of the pig, calf and mouse. This resulted in marked changes in the virulence of the virus for the ox, pig and infantile mouse (the guinea pig was not investigated), its cell pathogenicity for heterologous cultures, its contagiousness for the ox and pig, and its immunizing properties. Since the first modification of the virus was in a myotropic direction, it tended to lose its ability to proliferate in skin and mucous membranes earlier than in muscle. This change favoured the use of selected cell cultures to obtain a useable combination of effectiveness and harmlessness. The most significant modifications of the virus occurred by passage in the pig kidney. Not only did the virulence decrease, the immunising ability was reduced at the same time. Passage in pig kidney is thus least useful, as compared with passage in calf or mouse kidney, as a method of modifying the virus for the development of a live vaccine. Changes in virulence and contagiousness, whilst immunising properties remained unaffected, was best achieved by passage in calf kidney cultures. After 370 passages the virus was so modified that when injected intramuscularly in the live state into cattle it did not result in transmission by contact to pigs. Passage by the same method designed to produce a vaccine for pigs did not produce a suitable result. The type-specificity remained unaltered throughout the 450 passages in the three different types of culture. Resume Etude d'un vaccin vivant contre la fievre aphteuse, modifie par passage continu du virus en cultures cellulaires On fit subir au type A du virus de la fievre aphteuse 450 passages dans des cultures de cellules renales de porc, de veau et de souris. Le virus s'est fortement transforme au cours de ces passages. Les modifications biologiques concernaient la virulence pour le boeuf, le porc et la souris infantile (le cobaye ne fut pas teste), la cytopathogenite pour les cultures cellulaires heterologues, la contagiosite pour le boeuf et le porc et le pouvoir immunisant. Comme le virus, au cours du processus de modification, se transforma d'abord dans le sens d'un plus grand myotropisme, il perdit ses facultes de multiplication dans la peau et les muqueuses plus tot que dans la musculature. Ce facteur favorisait, a condition d'employer des cultures cellulaires appropriees, une combinaison utilisable sous le rapport de l'efficacite et de l'inocuite. Ce sont les passages dans les cultures de cellules renales de porc qui modifierent le virus de la facon la plus durable. Cependant, ils ne diminuerent pas seulement la virulence du virus, mais en meme temps ses proprietes immunisantes. Les passages en culture de tissu renal de porc representent pour cette raison, par rapport aux cultures de cellules renales de veau et de souris, le facteur de modification le moins approprie pour la preparation d'un vaccin vivant. Les meilleurs resultats pour combiner les modifications de la virulence et de la contagiosite avec la stabilite des proprietes immunisantes furent obtenues par le passage dans les cellules renales de veau. Apres 370 passages, le virus etait suffisamment modifie sous le rapport de l'inocuite et de l'efficacite pour qu'apres injection intramusculaire son emploi comme vaccin vivant chez le boeuf puisse etre envisage, car les boeufs vaccines ne contaminaient plus les porcs par contact. On n'a pas encore trouve de passage utilisable de la meme facon pour la vaccination des porcs. La specificite des types s'est conservee pendant les 450 passages dans les 3 milieux de culture differents. Resumen Pases permanentes de virus en cultivos celulares como factor modificante para el desarrollo de una vacuna viva contra la fiebre aftosa El tipo A del virus de la glosopeda se paso 450 veces por cultivos renales de cerdo, ternera y raton. Con ello, el virus se ha modificado grandemente. Las alteraciones biologicas afectaron a la virulencia para el ganado vacuno, cerdo y raton infantil (no se estudiaron los cobayas), la citopatogenia para cultivos celulares heterologos, la contagiosidad para la vaca y cerdo, y las propiedades inmunizantes. Puesto que durante el proceso de modificacion el virus se altero primero en sentido del miotropismo, perdio su capacidad de multiplicacion en piel y mucosas antes que en la musculatura. Utilizando cultivos celulares apropiados, este proceso favorecio la util combinacion de actividad e innocuidad. Los pases en cultivos renales porcinos modificaron mas el virus. En ellos no solo se disminuia la virulencia del virus, sino al mismo tiempo su propiedad inmunizante. Por ello, los pases a traves de cultivos en rinones porcinos son, en comparacion con los cultivados en rinones de ternera y raton, los menos apropiados como factor modificante para el desarrollo de una vacuna viva. Mediante pases en cultivos de rinones de ternera se pudo combinar mejor la alteracion de la virulencia y contagiosidad con la constancia de las propiedades inmunizantes. Tras 370 pases, el virus se habia modificado en el sentido de innocuidad y actividad en grado tal que tras inoculacion se podia poner en tela de juicio como vacuna viva para bovidos, ya que los bovinos vacunados no enfermaban a cerdos por contacto. Todavia no se hallo el pase, que de igual modo resultase apropiado para la vacunacion de cerdos. La especificidad de tipo ha quedado mantenida durante los 450 pases en los 3 diferentes tipos cultivados.